...无血清培养基_胚胎干细胞培养基-重庆市华雅干细胞技术有限公司

来自 : 发布时间：2024-05-02

PSGro人iPSC/ESC胚胎干细胞无血清培养基是为人类诱导的多能干细胞（IPSCs）和人类胚胎干细胞（ESCS）而设计的。它是无血清和化学定义的，因为它的所有成分是合成的化学品或纯化的重组蛋白。 PSGro人iPSC/ESC胚胎干细胞无血清培养基支持在细胞外基质蛋白(如BD Matrigel™)上的人iPSCs或人ESCs的无饲养生长和维持。其性能与市场*的mTeSR™1或E8相比，在生长速度、特征形态、插件标记、正常核型和向不同胚层的分化等方面都有一定的优势。PSGro人iPSC/ESC胚胎干细胞无血清培养基订购信息品牌 货号 产品描述 包装StemRD PGroF-500 PSGro-Free®iPSC/ESC Growth Medium 500mL/套人iPSC/ESC胚胎干细胞生长培养基欢迎您致电 重庆市华雅干细胞技术有限公司 189 2296 8205Q3054606584华雅干细胞-客服中心：4000212020内容和存储PSGro-Free®（Cat。＃PGroF）包含两个组件：组件尺寸存储保质期基础培养基（在凝胶冰上）450毫升2至8 C。 远离光明6个月10x补充剂（干冰）50毫升-20 C或以下。 远离光明6个月需要或建议的其他关键试剂细胞外基质蛋白，例如Matrigel TM（BD，cat＃354277）或等同物Accutase（Millipore，SCR005）或Collagenase IV（Invitrogen，17104）或同等物ROCK抑制剂Y-27632（StemRD，Y-01 / -05 / -25）或Thiazovivin（StemRD，Thia-01 / -05 / -25）中等准备在4 C下解冻PSGro-Free®补充剂。 如果需要，可以将解冻的Supplement等分并储存在-20 C或更低温度下，但应避免进一步冻融。要制备PSGro-Free®完全培养基，将1份补充剂加入9份基础培养基中。如果需要，可以将抗生素添加到完全培养基中。一旦制成，PSGro-Free®完全培养基在2至8 C的黑暗中储存时可稳定2周。具有细胞外基质蛋白的涂层板，例如Matrigel TM请参阅制造商的说明。 对于BD Matrigel™，可遵循以下程序：在冰上解冻Matrigel™。 用预冷的DMEM培养基稀释基质胶1:50。立即使用稀释的Matrigel™溶液涂覆组织培养板。 对于6孔板，每孔使用1 mL稀释的Matrigel™溶液，旋转平板使溶液均匀涂抹。让板在37℃下放置1小时或在4℃下放置过夜。欢迎您致电 重庆市华雅干细胞技术有限公司 189 2296 8205Q3054606584华雅干细胞-客服中心：4000212020生长无饲养细胞适应PSGro-Free®已经在较常用的hiPSC / ESC培养基中生长的人iPSC或ESC可以容易地适应PSGro-Free®。 用PSGro-Free®进行一轮1：1稀释的含血清或无血清培养基通常就足够了。 然而，对于某些媒体和细胞系，可能需要更长和更多的研究生适应。生长饲养细胞依赖细胞适应PSGro-Free®用Accutase，Collagenase IV或同等物质分离细胞。添加以前使用的培养基，轻轻刮去细胞作为聚集体。 理想的聚集体尺寸与其他介质类似，过度移液的单细胞可能会降低电镀效率。将具有细胞聚集体的悬浮液转移到15ml管中。在室温下以200 g离心5分钟。丢弃Matrigel™溶液，立即添加PSGro-Free®（例如，2 mL /孔用于6孔板）。离心后，弃去上清液，用2mL先前使用的培养基轻轻重悬沉淀。 注意：向培养基中添加ROCK抑制剂（Y-27632或Thiazovivin）可显着提高存活率和电镀效率。用PSGro-Free®将先前使用的培养基中的细胞聚集体转移到孔中。 混合。 轻轻地。在37℃，5％CO 2和95％湿度下培养细胞。如果星期五播种细胞，请在周一更换培养基至4 mL PSGro-Free®（周末无需更换）。 如果细胞在一周中的其他日子播种，则在第二天更换。欢迎您致电 重庆市华雅干细胞技术有限公司 189 2296 8205Q3054606584华雅干细胞-客服中心：4000212020PSGro-Free®中冷冻细胞的回收在37 C水浴中快速解冻hiPSC或hESC，将内容物转移至15 mL管中。 在温和混合下将10mL先前用于细胞的培养基滴加到管中。在室温下以200 g离心细胞5分钟。丢弃Matrigel™溶液，立即添加PSGro-Free®（例如，2 mL /孔用于6孔板）。离心后，弃去上清液，用2mL先前使用的培养基轻轻重悬沉淀。 注意：向培养基中添加ROCK抑制剂（Y-27632或Thiazovivin）可显着提高存活率和电镀效率。用PSGro-Free®将先前使用的培养基中的细胞聚集体转移到平板上。 轻轻混合。在37℃，5％CO 2和95％湿度下培养细胞。第二天将培养基更换为4 mL PSGro-Free®。在无饲养细胞条件下传代PSGro-Free®中的细胞在显微镜下观察以识别分化区域。 使用平板底部的镜头标记（例如，6孔板）标记分化的菌落通过用移液管*或抽吸刮擦去除分化区域。从细胞培养物中吸出培养基并用PBS冲洗。每孔加入0.5 mL Accutase或Collagenase IV。 在室温下静置1-2分钟。取出Accutase，用2 mL PSGro-Free®轻轻冲洗2-3次，以去除残留的酶。加入2 mL /孔PSGro-Free®并用细胞刮刀刮掉菌落。将分离的细胞聚集体转移至15 mL锥形管中，并用另外2 mL PSGro-Free®冲洗孔以收集任何剩余的聚集体。在室温下以200 g离心5分钟。吸出上清液。 通过轻轻移液将沉淀重悬于4 mL PSGro-Free®中。 注意：向培养基中添加ROCK抑制剂（Y-27632或Thiazovivin）可显着提高存活率和电镀效率。用PSGro-Free®将细胞聚集体铺在涂有Matrigel™的新平板上。在37℃，5％CO 2和95％湿度下培养细胞。 每天更换介质。如果星期五播种细胞，请在周一更换培养基至4 mL PSGro-Free®（周末无需更换）。 如果细胞在一周中的其他日子播种，则在第二天更换。 注意：如果菌落处于*密度，细胞可以每隔5-7天分裂，使用1：5到1:10的分裂。PSGro-Free®中细胞的低温保存准备含有90％PSGro-Free®和10％DMSO的冷冻培养基。 注意：向培养基中添加ROCK抑制剂（Y-27632或Thiazovivin）可显着提高存活率和电镀效率。在无饲料条件下，从PSGro-Free®中传代细胞进行步骤1-8轻轻吸出上清液，注意保持细胞沉淀完整。轻轻地将沉淀重悬于冷冻培养基中，注意使细胞聚集体比通常用于传代的细胞更大。将冷冻培养基中的1mL细胞聚集体转移到每个标记的冷冻管中。将小瓶置于异丙醇冷冻容器中，并将容器置于-80℃第二天转移到液氮罐中进行长期储存。欢迎您致电 重庆市华雅干细胞技术有限公司 189 2296 8205Q3054606584华雅干细胞-客服中心：4000212020提供产品：华雅干细胞致力于为中国干细胞领域的干细胞科学研究、脐带血/造血干细胞/脐带/脂肪/胎盘干细胞库、干细胞临床转化医学、干细胞美容及干细胞抗衰老、免疫细胞治疗、T细胞治疗、临床干细胞治疗等再生医学和个体化治疗产业链的相关客户提供：MSC间充质干细胞培养基、iPS/ES胚胎干细胞培养基、血清替代物、羊水培养基、基底膜基质胶细胞支架、干细胞生长分化调控因子、BioMarker 流式检测抗体、支原体检测试剂盒、内毒素检测试剂盒、干细胞存储细胞冻存袋、细胞培养瓶、USP级DMSO二甲基亚砜细胞冻存液、细胞培养相关试剂耗材仪器等种类丰富的产品，以 Focus on improving the quality of Stem Cells专注干细胞研究，提升干细胞品质 为己任，我们与客户携手为中国干细胞产业的发展而前行。重庆市华雅干细胞技术有限公司主营：干细胞、细胞冻存、细胞治疗、试剂耗材 相关板块的产品，以 传递科学价值，服务科学研究 为宗旨，经过近五年的努力推广，重庆市华雅干细胞技术有限公司在全中国代理的BD科研产品、OriGen干细胞冻存袋等产品已经成功销往：上海市、北京市、重庆市、天津市、广东省的广州市、深圳市、珠海市、江西省的南昌市、四川省的成都市、绵阳、浙江省的杭州市、宁波、温州、江苏省的南京市、苏州、无锡、泰州、湖南省的长沙、陕西省的西安市、杨凌、甘肃省的兰州、宁夏的银川、新疆的乌鲁木齐、广西省的南宁市、山东省的济南、青岛、东北三省 辽宁省的沈阳市、大连市、吉林省的长春市、黑龙江省的哈尔滨市等中国绝大部分省市和自治区。欢迎您致电 重庆市华雅干细胞技术有限公司 189 2296 8205Q3054606584华雅干细胞-客服中心：4000212020